Αυτό το άρθρο θα αφιερωθεί στο φαινόμενο της αντίδρασης κατακρήμνισης. Εδώ θα εξετάσουμε τα χαρακτηριστικά της διατύπωσης αυτού του φαινομένου, το φαινόμενο της διάχυσης, τα γενικά χαρακτηριστικά, τον ρόλο στην ανθρώπινη ζωή και πολλά άλλα.
Εισαγωγή στο φαινόμενο
Η καθίζηση είναι ένα φαινόμενο ορολογικού τύπου, κατά το οποίο τα διαλυτά αντιγόνα αλληλεπιδρούν με αντισώματα και, ως αποτέλεσμα, παρατηρείται καθίζηση - ένα ίζημα.
Το γενικό χαρακτηριστικό της αντίδρασης καθίζησης είναι μια μορφή συντονισμένη επίδραση αντιγόνου και αντισώματος. Αυτοί οι τύποι αλληλεπιδράσεων καθιστούν δυνατό τον προσδιορισμό της παρουσίας άγνωστων αντιγόνων στην υπό δοκιμή ουσία με την προσθήκη γνωστών αντισωμάτων και αντιγόνων. Η διαδικασία κατακρήμνισης χωρίς την παρουσία αλάτων θα προχωρήσει χειρότερα και το καλύτερο βέλτιστο βρίσκεται εντός της περιοχής 7,0-7,4 pH.
Συστατικά μιας αντίδρασης
Υπάρχουν τρία κύρια στοιχεία μεταξύ των συστατικών της αντίδρασης καθίζησης:
- Ένα αντιγόνο με μοριακή φύση. Είναι σε κατάσταση λεπτού τύπου, με άλλα λόγιαδιαλυτός. Επίσης, ένα τέτοιο αντιγόνο ονομάζεται ιζηματογόνο, το οποίο είναι προϊόν λύσης ή εκχύλισμα ιστού κ.λπ. Ένα ιζηματογόνο έχει μια χαρακτηριστική διαφορά από ένα συγκολλητογόνο, η οποία έγκειται στο μέγεθος των σωματιδίων από τα οποία αποτελείται. Το συγκολλητογόνο έχει εγγενές μέγεθος κυττάρου και τα ιζηματογόνα είναι ανάλογα με το μέγεθος του μορίου. Το διάλυμα αντιγόνου χαρακτηρίζεται από διαφάνεια.
- Ένα αντίσωμα που βρίσκεται στον ορό του ανθρώπινου αίματος, καθώς και στον ανοσοδιαγνωστικό ορό, ο οποίος περιέχει τα μελετημένα αντισώματα.
- Οι ηλεκτρολύτες είναι διαλύματα χλωριούχου νατρίου που είναι ισοτονικά.
παραγωγή ιζηματογόνου
Η δημιουργία μιας αντίδρασης καθίζησης είναι αδύνατη χωρίς ένα ιζηματογόνο, το οποίο λαμβάνεται με άλεση υλικών και εξαγωγή πρωτεϊνικών αντιγόνων από αυτά. Η εκχύλιση γίνεται με βρασμό ή με άλλες μεθόδους.
Λύματα, καθώς και εκχυλίσματα ιστών και οργάνων, ορός αίματος, διάφοροι τύποι διηθημάτων που βασίζονται σε καλλιέργειες μικροβιακού ζωμού, καθώς και εκχύλισμα άλατος μικροοργανισμών και ουσίες αυτόλυσης, είναι εντυπωσιακά παράδειγμα ιζηματογόνων.
Ρύθμιση σε βροχόπτωση
Ας εξετάσουμε τώρα τη μέθοδο ρύθμισης της αντίδρασης καθίζησης.
Εκτελείται μια αντίδραση δακτυλίου-κατακρήμνισης, η οποία λαμβάνει χώρα σε ειδικά προετοιμασμένους δοκιμαστικούς σωλήνες. Ο ορός εισάγεται στην κοιλότητα των πιάτων, χύνοντάς τον στον τοίχο με τη βοήθεια ενός στομίου πιπέτας. Στη συνέχεια, η κατάλληλη ποσότητα κατακρημνιστή τοποθετείται προσεκτικά στην κορυφή και στη συνέχεια ο σωλήνας φέρεται σε κάθετη θέση από οριζόντια. Η εγκατάσταση και η συνεκτίμηση της αντίδρασης καθίζησης είναι μια πολύ σχολαστική λειτουργία. Το αποτέλεσμα καταγράφεται μετά την εμφάνιση ενός λευκού δακτυλίου στο όριο μεταξύ αντιγόνου και αντισώματος. Εάν τα αντιδρώντα στοιχεία της αντίδρασης αντιστοιχούν μεταξύ τους, τότε δεσμεύονται, αλλά αυτό γίνεται αντιληπτό μετά από μεγάλο χρονικό διάστημα της αλληλεπίδρασής τους. διαφάνεια, όπου μεταφέρεται γέλη άγαρ, εφαρμόζοντάς το σε μια μικρή στρώση. Αφού σκληρύνει στο πήκτωμα, κόβεται ένας μικρός αριθμός φρεατίων στα οποία θα τοποθετηθούν αντιγόνα και αντισώματα. Υπάρχουν δύο τρόποι για την εκτέλεση αυτής της ενέργειας: η μέθοδος της ακτινικής ανοσοδιάχυσης και η διπλή ανοσοδιάχυση.
Γενικές πληροφορίες
Η μηχανική του έργου της καθίζησης είναι παρόμοια με τη συσκευή συγκόλλησης. Υπό την επίδραση του ανοσοποιητικού ορού, το αντιγόνο, το οποίο έχει ήδη εισέλθει στην αντίδραση, μειώνει τον βαθμό διασποράς του. Μια σημαντική προϋπόθεση είναι η διαφάνεια τόσο του ορού όσο και του αντιγόνου.
Μπορείτε να βελτιώσετε την καταχώρηση της αντίδρασης εάν τοποθετήσετε αντιγόνα σε αντισώματα. Ως αποτέλεσμα, μπορεί να παρατηρηθεί η εμφάνιση ιζημάτων με τη μορφή δακτυλίου. Αυτό το φαινόμενο ονομάζεται κατακρήμνιση δακτυλίου και πραγματοποιείται σε ειδικούς σωλήνες με διάμετρο 2,5 έως 3,5 mm. Ένα από τα πιο κοινά παραδείγματα αντίδρασης καθίζησης είναι η διάγνωση του άνθρακα.
Η κατακρήμνιση καθιστά δυνατό τον προσδιορισμό του επιπέδου τοξικότητας μιας καλλιέργειας διφθερίτιδας σε άγαρ.
Κατά την υπό εξέταση αντίδρασηπαρουσιάζεται καθίζηση αντιγονικών συμπλεγμάτων και αντισωμάτων. Η κατακρήμνιση είναι ένα ανοσολογικό φαινόμενο που σας επιτρέπει να προσδιορίσετε την ποσότητα των αντισωμάτων στον ορό του αίματος ενός άρρωστου ή εμβολιασμένου ατόμου και ζώων.
Συνέπεια τιτλοδότησης
Είναι σημαντικό να γνωρίζετε ότι τα δεδομένα που λαμβάνονται με τιτλοδότηση της παραπάνω μεθόδου δεν είναι ποσοτικά μετρήσιμα. Για να δημιουργηθεί και να αναλυθεί μια ποσοτική εκτίμηση του περιεχόμενου αριθμού αντισωμάτων, αναπτύχθηκε μια ειδική τεχνική αντίδρασης από τους M. Heidelberger και E. Kabat, η οποία βασίζεται στην αναζήτηση και τον προσδιορισμό της ζώνης ισοδυναμίας. Η ανάμειξη του αριθμού ηλικίας των αντιγόνων με έναν σταθερό όγκο αντιορού οδηγεί σε αύξηση του αρχικά σχηματισθέντος ιζήματος και στη συνέχεια μειώνεται πάλι λόγω της αύξησης της ικανότητας διάλυσης των συμπλεγμάτων αντιγόνου. Προσδιορίζοντας την ποσότητα των αντισωμάτων στα υπερκείμενα που περιέχονται σε κάθε σωληνάριο, μπορείτε να διαπιστώσετε ότι σε έναν ορισμένο αριθμό πιάτων με αντισώματα θα λείπει υγρό. Εδώ, σε σύγκριση με άλλους δοκιμαστικούς σωλήνες, θα σχηματιστεί το μεγαλύτερο ίζημα. Λόγω αυτού και της αφαίρεσης του ιζήματος της αντιγονικής πρωτεΐνης από τη συνολική τιμή των πρωτεϊνών, είναι δυνατό να ληφθεί η ακριβής τιμή των αντισωμάτων που περιέχονται στον όγκο του συγκεκριμένου ορού που μελετάται. Επιπλέον, η ποσότητα των μορίων πρωτεΐνης του ιζήματος προσδιορίζεται από την ποσότητα αζώτου ή χρησιμοποιώντας χρωματομετρικές μεθόδους.
Αξιολόγηση τιμών
Η εκτίμηση των τιμών κατακρήμνισης στη διαγνωστική μεθοδολογία θα πρέπει να λαμβάνει υπόψη την πιθανότητα παρουσίας στον ανοσοορό ενός αντισώματος που δεν έχει την ιδιότητα της ιζηματίνης, από την οποία προκύπτει ότι το ίδιο το ίζημα μπορεί να μην είναι σχηματίζεται μετά από αντίδραση με αντιγόνα. Ο κατάλογος τέτοιων μορίων περιλαμβάνει ημιτελή αντισώματα και ορισμένα είδη από την ομάδα των γ-Α σφαιρινών.
Η αντίδραση καθίζησης σε εργαστηριακές συνθήκες βρίσκει την εφαρμογή της σε διάφορους τύπους τροποποιήσεων. Για παράδειγμα, η αντίδραση θερμοκατακρήμνισης χρησιμοποιείται για την ανίχνευση βακτηριακών αντιγόνων αλλαντίασης, άνθρακα κ.λπ., τα οποία δεν υφίστανται θερμική μετουσίωση. Σε αντίθεση με την κατακρήμνιση δακτυλίου, αυτός ο τύπος αντίδρασης χρησιμοποιεί διηθήματα του εν λόγω υλικού σε βρασμένη κατάσταση.
Η ανάλυση της αντίδρασης καθίζησης σε ένα σύνθετο μείγμα δεν επιτρέπει σε κάποιον να χαρακτηρίσει τις ιδιότητες μεμονωμένων στοιχείων του μείγματος. Σε τέτοιες περιπτώσεις, ένα άτομο καταφεύγει στη μέθοδο της καθίζησης σε άγαρ και επίσης χρησιμοποιεί ανοσοηλεκτροφόρηση.
Διάχυτη κατακρήμνιση
Σε αυτόν τον τομέα της έρευνας, υπάρχει η έννοια της διάχυτης αντίδρασης κατακρήμνισης (RPD). Βασίζεται στην ικανότητα διάχυσης στο πήκτωμα αντισωμάτων και διαλυτών αντιγόνων. Η διάχυση είναι η ικανότητα ενός μορίου μιας συγκεκριμένης ουσίας να διεισδύει στα μόρια μιας άλλης, η οποία προκαλείται από τη θερμική κίνηση.
Το gel είναι ένα σύστημα διασκορπισμένου τύπου στο οποίο η υγρή φάση κατανέμεται ομοιόμορφα στη στερεά φάση. Τις περισσότερες φορές χρησιμοποιείται γέλη άγαρ για μια τέτοια αντίδραση.
Μετά την παροχή των παραμέτρων, σεσυνθήκες υπό τις οποίες τα μόρια μπορούν να διαχέονται μεταξύ τους, η συνάντησή τους θα συνοδεύεται από το σχηματισμό ενός συμπλόκου αντιγόνου + αντισώματος. Ένα τέτοιο νεόπλασμα είναι σε θέση να διαχέεται, όντας στο ίδιο το πήκτωμα, και θα καταβυθιστεί, παίρνοντας τη μορφή μιας λωρίδας που μπορεί να ανιχνευθεί με γυμνό μάτι. Εάν το αντιγόνο και το αντίσωμα είναι ομόλογα, δεν θα σχηματιστεί ζώνη.
Η δημιουργία των συνθηκών υπό τις οποίες θα λάβει χώρα η διάχυση ενώ βρίσκεται στο στρώμα άγαρ περιλαμβάνει την έκχυση των συστατικών, αλλά ο συνολικός αριθμός φρεατίων και η σχετική θέση τους καθορίζονται από αποφασίζει το είδος της εργασίας που απαιτείται. Το RPD δίνει σε ένα άτομο τη δυνατότητα να ανιχνεύει και να αναγνωρίζει άγνωστους απομονωμένους ιούς με δοκιμές χρησιμοποιώντας γνωστούς ορούς αντισωμάτων.
Αίτηση
Η κατακρήμνιση χρησιμοποιείται ευρέως όχι μόνο στη διάγνωση ασθενειών, αλλά βρίσκει εφαρμογή και στην ιατροδικαστική εξέταση. Είναι δύσκολο να φανταστεί κανείς μια ανάλυση στην οποία είναι δυνατός ο προσδιορισμός του είδους του αίματος, του μέρους ενός οργάνου ή του ιστού που βρίσκεται σε ένα όπλο εγκλήματος που δεν χρησιμοποιεί την αντίδραση κατακρήμνισης. Κατά τη διάρκεια αυτής της διαδικασίας, χρησιμοποιούνται οροί καθίζησης, οι οποίοι λαμβάνονται με ανοσοποίηση διαφόρων ζώων και πτηνών. Είναι σημαντικό το επίπεδο του τίτλου του ορού να μην είναι μικρότερο από 1:10000 και πρέπει επίσης να έχει επαρκή ειδικότητα. Από το ανιχνευμένο σημείο αίματος ή το φλοιό του, ένα εκχύλισμα γίνεται για φυσική. λύση, η οποία θα εκτεθεί περαιτέρωορός καθίζησης. Σύμφωνα με αυτή την αντίδραση, είναι δυνατό να καθοριστούν οι τύποι πρωτεϊνών ιστών και οργάνων τόσο των ανθρώπων όσο και των ζώων. Η λήψη θολό εκχυλισμάτων αναγκάζει κάποιον να καταφύγει σε καθίζηση σε άγαρ.
Συμπεράσματα
Αναλύοντας τις πληροφορίες που διαβάσατε, μπορούμε να συμπεράνουμε ότι οι αντιδράσεις κατακρήμνισης είναι εξαιρετικά σημαντικές για ένα άτομο, καθώς επιτρέπουν τη διάγνωση διαφόρων αντιγόνων με τη χρήση αντισωμάτων, αυτό το φαινόμενο χρησιμοποιείται επίσης ευρέως στην ιατροδικαστική εξέταση και σας επιτρέπει να προσδιορίσετε τον τύπο αίματος, ιστού ή οργάνου σε σχέση με ένα συγκεκριμένο θέμα. Υπάρχουν διάφοροι τύποι και μέθοδοι κατακρήμνισης, που χρησιμοποιούνται σύμφωνα με τις αναδυόμενες ανάγκες του προβλήματος που επιλύεται.
